球体培养需要哪些步骤?

球体培养需要一步步的完成，并不是一次性就能够实现的，而且每一步都需要小心翼翼才能够提高球体培养的成功率，那么球体培养到底有什么样的步骤呢？

　　球体培养步骤：

　　1. 琼脂铺底的培养瓶：30ml无菌培养瓶，每瓶中加5 ml 2%琼脂培养基，冷却，形成平坦底层后备用。


　　2.取生长状态良好已连接成片的细胞，用弯头吸管伸入瓶内，把细胞纵横割划成若干小区后，倒出培养液。

　　3.加入0.25%的胰蛋白酶液，在倒置显微镜下边消化边观察，当细胞小区边缘微卷起后便立即终止消化，倒出消化液，用Hanks轻轻漂洗一次，加入新培养液3——5 ml，用吸管把已松动的细胞片吸打下来，分装入1——3个含2%琼脂培养基底层的培养瓶中，置温箱继续培养，数日后便可生长成细胞球体。

　　4.换液：培养1——2日后，如需换液，微倾斜培养瓶，令培养液集于培养瓶底角，停片刻，待球体细胞下沉后，吸除部分培养液，再补充新培养液。

　　球体培养当中所使用的一些工具以及所使用的添加剂，都是要按照严格的专业需求去选择，并不是随便的一切都能够使用的球体培养所使用的这些设备，或者是添加剂在康宁平台当中都可以找到，如果有需要的话可以去看一看。  

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